尊龙凯时提供的间充质干细胞成脂诱导分化试剂盒,货号:YJ-MSCYD-004,价格:12800元,规格有100ml和200ml可选。
产品描述
该试剂盒经过团队精心优化,旨在增强间充质干细胞向成脂细胞分化的能力。请注意,该产品仅适用于科研用途,禁止用于诊断、治疗、临床、家庭及其他用途。
产品组成及保存
本产品包括以下成分:
- 诱导分化添加剂Ⅰ:5mL/10mL,保存条件-20℃,有效期1年
- 诱导分化添加剂Ⅱ:1mL/2mL,保存条件-20℃,有效期1年
- 优质胎牛血清:10mL/20mL,保存条件-20℃,有效期1年
- 细胞基础培养基:85mL/170mL,保存条件4℃,有效期1年
- 油红O染色液:5mL/10mL,保存条件4℃避光,有效期1年
注意:为确保产品的有效性,请避免反复冻融。此外,配制好的诱导培养基应保存于2-8℃,有效期为2周,请根据实验需要合理配制。
产品使用说明
1. 成脂诱导分化完全培养基的配制
在室温条件下融化各因子及血清。融化后瞬时离心,使溶液集中于离心管底部。若因子或血清中有沉淀,属于正常现象,无需过滤,以免成分丢失。
根据实验用量,在无菌操作台中配制诱导分化完全培养基,建议每次配制50mL,配制比例如下:
试剂成分 | 配制比例 | 50mL配制体系 |
---|---|---|
诱导分化添加剂Ⅰ | 5% | 25mL |
诱导分化添加剂Ⅱ | 0.1% | 50uL |
优质胎牛血清 | 10% | 5mL |
细胞基础培养基 | 85% | 425mL |
2. 成脂诱导分化实验步骤
建议取第3至5代、纯度达90%以上且状态良好的间充质干细胞,消化后离心收集,使用含10% FBS的完全培养基调整细胞密度,均匀铺于培养瓶/板中,放置于37℃、5% CO2、饱和湿度的培养箱中培养。
培养器皿底面积 | 细胞量 | 培养液体积 |
---|---|---|
24孔培养板 2cm/孔 | 2×105cell/孔 | 1mL/孔 |
12孔培养板 4.5cm/孔 | 4.5×105cell/孔 | 2mL/孔 |
6孔培养板 9.6cm/孔 | 9.6×105cell/孔 | 2mL/孔 |
T25培养瓶 25cm | 25×105cell | 5mL |
6cm培养皿 21cm | 21×105cell | 5mL |
10cm培养皿 55cm | 55×105cell | 10mL |
当细胞融合度达到80%至100%时,即可进行诱导分化。小心吸去细胞培养上清,沿孔壁缓慢加入提前配制好的诱导分化完全培养基,置于37℃恒温细胞培养箱中培养。每2至3天更换一次新鲜的诱导分化完全培养基。
3. 油红O染色分析
诱导分化结束后,小心吸去细胞培养上清,用1×PBS润洗1至2次。加入适量细胞固定液,室温固定30分钟。配制油红O工作液时,油红O贮存液与蒸馏水按照3:2比例配制,并混匀后过滤。
细胞固定后,吸去固定液,用1×PBS润洗2次,沿孔壁缓慢加入适量油红O工作液,室温染色30分钟。染色后吸出染色液,PBS润洗去掉浮色,在显微镜下观察细胞染色效果,细胞内油滴应呈红色。
尊龙凯时的间充质干细胞成脂诱导分化试剂盒不仅精确高效,而且为科研提供了坚实的支持,是生物医疗领域的理想选择。