尊龙凯时细胞简介 该细胞系源自一名1岁的男孩，患有急性单核细胞性白血病，并通过外周血分离建立。此细胞具有乳胶颗粒和激活红细胞的吞噬能力，其细胞膜和胞浆内不含免疫球蛋白，同时表达C3R和FcR。此细胞可通过佛波酯TPA诱导向单核系方向分化，并可作为转染宿主进行进一步研究。

细胞信息 细胞名称：THP-1人单核细胞白血病 生长特性：悬浮生长，低密度易聚团，高密度时则分散。 倍增时间：60-70小时（PubMed=6970727）；26小时（PubMed=25984343）；约35-50小时（DSMZ=ACC-16）。 换液频次：每周2~3次 传代比例：1:2-1:4（具体依据实际细胞量决定） 细胞密度：以8×10⁶/ml进行传代，切勿超过1×10⁶/ml。

培养基推荐配方： RPMI-1640（尊龙凯时货号：ZQ-200）+10%胎牛血清（尊龙凯时货号：ZQ0500）+1%双抗（尊龙凯时货号：CSP006）+β-Mer，终浓度为0.05mM（尊龙凯时货号：CSP005，例：500ml培养基中添加500μl）。 β-巯基乙醇是一种常用的培养补充剂，具有抗氧化的作用，能降低氧化应激对THP-1细胞的影响。在细胞密度较高时，可以适量增加巯基乙醇的使用量（不超过推荐量的15倍）。

THP-1细胞复苏 细胞复苏后通常需3-5天恢复状态。由于细胞对密度有依赖性，若复苏时去除了冻存液，建议在复苏后的48小时内不进行操作。细胞在低密度时会呈现团聚生长，这属于细胞快速增殖的正常现象。

THP-1细胞传代： A. THP-1细胞为悬浮细胞，具低密度依赖性，细胞密度达到8×10⁵个活细胞/mL时需进行传代。细胞密度不得超过1×10⁶活细胞/mL。 B. 传代比例通常为1:2-4，可分瓶后直接补充培养液，无需离心。以T25培养瓶为例，分瓶后可添加新鲜完整培养基至7ml。 C. 对悬浮细胞的密度控制不佳时，建议通过细胞计数来调整。 D. 在培养约一周后，可进行一次离心，以去除部分死细胞。

THP-1细胞冻存： A. 使用10% DMSO：900μl FBS + 100μl DMSO（使用时请注意操作安全）或直接使用无血清冻存液。 B. 将生长状态良好的细胞收集于15mL离心管中，将细胞浓度调整至2-3百万/mL的凍存液比较合适。 C. 根据状况可以放入-80℃培养箱中保存最长3个月，尽快转移至液氮中进行长期保存。

THP-1培养过程中的常见问题： 1. 如果THP-1细胞在培养过程中出现聚团，少量聚团呈现葡萄串状是正常的，特别是在细胞密度较低时。高密度时细胞会自然分散。若聚团现象严重，可通过观察细胞状态、调整β-巯基乙醇的添加量、或者更换血清品牌及增加血清比例（不超过20%）来改善。 2. 少量THP-1细胞贴壁为正常现象，可以轻轻吹打收集细胞或直接丢弃贴壁的细胞。但若贴壁细胞超过20%，须检查培养环境，包括温度、CO2浓度、培养基成分等。可考虑使用未处理的培养瓶，因为这不利于细胞贴壁。 3. THP-1细胞复苏率低，建议在冻存时适当提高细胞量，冻存时活细胞密度不可低于100万-300万/mL，复苏后细胞密度也有依赖性。待细胞复苏后需培养3-5天方可恢复。若有细胞碎片，可待细胞密度增高后以低速离心去除。该细胞为悬浮细胞，培养时尽量减少对细胞的离心处理。更换培养液时，不应完全替换。 4. 添加β-巯基乙醇时，应当现配现用，切勿直接添加至已有培养基中长期储存，以免影响其稳定性。