尊龙凯时提供的转铁蛋白受体(TFR) Elisa试剂盒专门用于科学研究,禁止用于医学诊断。该试剂盒应用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA),以检测标本中的adropin(AD)水平。
试剂盒的工作原理为:在预包被有adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入待测样本、标准品及HRP标记的检测抗体。经过温育和彻底洗涤后,添加底物TMB。TMB在过氧化物酶的催化下,首先转化为蓝色,随后在酸性环境中转化为黄色。最终颜色的深浅与样品中的adropin(AD)浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),进而计算样本浓度。
样本的收集、处理及保存须遵循以下方法:
1. 血清:需使用无热原和内毒素的试管,并避免细胞刺激。收集血液后,以3000转进行10分钟的离心,迅速小心地分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,进行3000转离心,持续30分钟,取上清液。
3. 细胞上清液:进行3000转离心10分钟,以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合后捣碎,并在3000转离心10分钟后取上清液。
5. 保存方法:若样本在收集后未及时检测,需按单次使用量分装并冷冻于-20℃,避免反复冻融,解冻时确保样品均匀充分解冻于室温下。
在实验过程中请确保准备好相关物品并注意操作细节。该试剂盒的组成包括标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂准备方面,20×洗涤缓冲液需按照1:20的比例进行稀释,即1份20×洗涤缓冲液混合19份蒸馏水。
结果判断和标准曲线绘制:在Excel中以标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标,绘制出标准线性回归曲线,并根据曲线方程计算各样本浓度。
免责声明:尊龙凯时对试剂盒的使用结果不承担责任,使用者需在合规的前提下进行科学研究。